由于MTT对细胞毒性较大，目前更常用的细胞活性检测方法为CCK-8检测。CCK-8检测灵敏度更高、更易溶解、并且更加稳定，因此相关试剂盒产品具有背景吸光度低、线性范围宽、检测灵敏度高，操作简单，细胞毒性小等优点。其基本原理为：该试剂中含有WST-8[化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，WST-8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料。甲臜染料能够溶解在组织培养基中，与活细胞数量成正比。
实验步骤
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制作标准曲线
先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴)，OD值为纵坐标(Y轴) 的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间)。
计算公式：
细胞存活率= [(As-Ab]/(Ac-Ab)]×100%
抑制率= [(Ac-As] / (Ac-Ab)]×100%
As:实验孔(含有细胞的培养基、CCK8、毒性物质) Ac:对照孔(含有细胞的培养基、CCK8、没有毒性物质)Ab:空白孔(不含细胞和毒性物质的培养基、CCK8)
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细胞活性检测
在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱预培养(在37°C，5%CO2 的条件下)。向每孔加入10μL的CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。
将培养板在培养箱内孵育1-4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度。如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL的0.1M HCl 溶液或者1%w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。