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Calcein AM是一种常用的活细胞标记荧光探针，它是在Calcein(钙黄绿素)的基础上增加了乙酰氧基甲酯(AM)基团，从而增强了其疏水性，因此能够很容易穿透活细胞膜，被细胞内的酯酶水解后生成具有绿色荧光的Calcein分子，从而标记细胞。
实验步骤
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制备Calcein-AM母液
用1mL无水DMSO溶解1mg Calcein AM，制备成1mmol/l的Calcein-AM母液，-20℃下密闭冷冻保存；
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母液稀释
用PBS或DMSO将Calcein AM母液稀释制成1-50µM的Calcein AM溶液(现配现用)；
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加入Calcein AM溶液
吸掉预培养好的细胞中的培养基，用合适的缓冲液清洗2-3次；加入适量的Calcein AM溶液， 在37℃培养细胞15-30分钟；用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次；
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荧光显微镜观察
用494nm激发波长，515nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。如果Calcein AM很难进入细胞，可以使用表面活性剂。