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4.6.2 PI染色检测细胞凋亡

| 4.6.3 JC-1检测细胞凋亡

视频素材来源于abnova  https://www.youtube.com/watch?v=JuHk08g6NMg
版权归原作者所有

 

荧光染料PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测,英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用,能同时对活细胞和死细胞染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm615nm

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 1

    收集细胞

    收集细胞,PBS 洗涤细胞一次,2000rpm离心5分钟,用PBS重悬细胞,调整细胞浓度约为106个/mL

  • 2

    加入PI染液

    如果是显微镜观察:取100μL细胞悬液,加入2-10μL PI染液,轻轻混匀;4℃避光放置5min后,滴加于载玻片上,加盖玻片;

    如果是流式检测:500μL细胞悬液中加入5μL PI染液4℃避光放置30min

  • 3

    检测

    荧光显微镜或者流式细胞仪检测。

     

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