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荧光染料PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测,英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用,能同时对活细胞和死细胞染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。
实验步骤
- 1
- 2
- 3
收集细胞
收集细胞,PBS 洗涤细胞一次,2000rpm离心5分钟,用PBS重悬细胞,调整细胞浓度约为106个/mL;
加入PI染液
如果是显微镜观察:取100μL细胞悬液,加入2-10μL PI染液,轻轻混匀;4℃避光放置5min后,滴加于载玻片上,加盖玻片;
如果是流式检测:500μL细胞悬液中加入5μL PI染液;4℃避光放置30min;
检测
荧光显微镜或者流式细胞仪检测。