标新立异的光谱染料新成员
BD Horizon RealBlue™744(RB744)试剂是专门设计 BD HorizonTMReal 系列家族成员。RB744 荧光染料是专门设计的减少溢出,从而改善Panel分辨率,实现高参数实验光谱流量仪器。RB744 是一种明亮的荧光染料,非常适合低表达表面标记物和细胞内标记物在 BD FACSymphonyTM上运行良好分析仪和光谱流式细胞仪。
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特征
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特征一:唯一激发*,光谱更集中,Panel 设计更容易
*其他激发峰值小于主峰 15%△点击放大图片
RB744 具有 561nm 黄绿色激光的最小交叉激光激发,可以很容易地分辨低表达标记物RB744 的归一化发射曲线,表明其在紫外、紫色、黄绿色和红色通道中的低发射特征二:更亮更稳定,解析能力更强
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人全血用PE(左)或BD Horizon™RB744试剂(右)CD25(2A3)染色,与APC CD4(SK3,数据未显示)共染色,用BD Pharm Lyse™裂解缓冲液裂解,并在BD FACSymphony™A5 SE细胞分析仪上进行补偿采集。
特征三:更多选择,全方位适配所有方案设计
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与用含有 RB744 的 17 色 T 细胞板染色的静息 T 细胞相比,活化 T 细胞上抑制性标志物的表达。 在用或不用葡萄球菌肠毒素 B(SEB,1µg/mL)和CD28(1µg/mL)刺激3天之前,分离外周血单个核细胞并用 BD Horizon™紫罗兰增殖染料450加载。在用BD Cytofix/Cytoperm™固定/渗透缓冲液固定和渗透之前,用 BD Horizon™ 可固定活性染色剂 620 和针对细胞表面标志物的抗体对细胞进行染色。在BD FACSymphony™A5 SE 细胞分析仪上采集染色细胞,并用 FlowJo™软件进行分析。
A) 排除沾粘、死细胞和谱系阳性细胞后检T细胞亚群的门控策略。 基于CD25 和 CD69 的表达,进一步评估 CD8+ T细胞的活化阶段。
B) 直方图叠加显示受刺激组 CD8+ T细胞亚群上抑制性受体的表达。未刺激组的 CD8+ T细胞总数(顶部,深绿色)。
特征四:兼容性高
Buffers Results BD FACS™ Lysing Solution and BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer Compatible CellBlox™ Blocking Buffer Compatible BD Cytofix™ Fixation Buffer Stable at least 24 hours 1% PFA Stable at least 24 hours BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation and Permeabilization Solution Compatible with antibody staining before and after fixation BD FACS™ Permeabilizing Solution II Compatible with antibody staining before and after fixation BD Phosflow™ Perm Buffer III Compatible with antibody staining before and after fixation EDTA and Heparin Compatible BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer (BSB) Compatible