(以下所有步骤均以转染试剂jetPRIME进行DNA转染为例)
为了获得最佳的DNA转染条件,我们建议转染时使用达到60%-80%汇合度的细胞。通常,对于在6孔板中进行的实验,在转染前24小时,每孔将约20万个细胞接种在2mL细胞生长培养基中。对于其他培养板形式,请参考表1。
实验步骤
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表1.转染前一天推荐的的细胞培养数
Culture vessel Number of cells to seed Surface area per well (cm2) Volume of medium per well to seed the cells (mL) 96-well 7500 - 25 000 0.3 0.125 24-well 40 000 -100 000 1.9 0.5 12-well 80 000 -150 000 3.8 1 6-well / 35 mm 150 000 - 400 000 9.4 2 60 mm / flask 25 cm2 200 000 - 850 000 25-28 5 100 mm / flask 75 cm2 1 x 106 - 4 x 106 75-78.5 10 150 mm / flask 175 cm2 5xl06 153 -175 20