实验步骤
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如何使用jetPRIME® 进行多个质粒DNA共转？
对于多个质粒共转，推荐每孔的总DNA用量不超过jetPRIME® 说明书上指定的大DNA用量。每种质粒的使用比例根据质粒的大小、结构和预期的表达水平而定。每种质粒用量应至少占每孔总DNA用量的10%。
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使用jetPRIME进行DNA转染，存在质粒大小的限制吗？
使用jetPRIME® 进行DNA转染，没有质粒大小的限制。但是，请记住对于同样DNA量，大质粒的基因拷贝数低于小质粒。
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难转细胞如何进行转染？
一些悬浮细胞和原代细胞比如淋巴细胞、成纤维细胞、神经元，很难用化学试剂进行转染，因此对于这类细胞通常推荐电转或病毒转。
除了用这些方法转染难转细胞，Polyplus-transfection开发了一种基于聚合物的转染试剂jetMESSENGER™ 。它用于mRNA的转染，并在各种难转细胞如淋巴细胞、神经元和多种原代细胞中显示出高转染效率。相比DNA转染，mRNA转染获得更高的转染效率，转染后蛋白表达更快，与质粒或病毒载体的转染相比，无插入突变的风险。
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使用jetPRIME进行质粒转染的机制是什么？
jetPRIME®与DNA相互作用形成阳离子复合物，通过内吞作用进入细胞。核内体通过质子海绵机制在细胞质基质中释放出DNA (Behr, Chimia 1997)。质粒大多数在有丝分裂期间，核膜消失时进入细胞核。由于这个原因，原代细胞或细胞分裂慢的细胞系通常很难转染。
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我的细胞比较脆弱，无血清时不能生长。我可以尝试在有血清的条件下转染吗？
与许多其他转染试剂相反，在有血清的环境下，jetPRIME®的效率更高。因此，转染复合物可以直接加到含血清培养基的细胞中。
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在 jetPRIME®转染的过程中可以使用抗生素吗？
jetPRIME®的转染效率不受抗生素的影响。jetPRIME®的常规批次质检都是在含血清和抗生素的培养基中进行的。
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jetPRIME®是否适用于病毒包装？
jetPRIME®可以用在传统培养基中进行病毒包装。实际上，在用于病毒包装的常规细胞中，使用jetPRIME® 的转染效率可达90%，例如HEK-293及其衍生株、CHO, VERO, WOP和BHK细胞，因此会产生高病毒滴度(Dewannieux, M., Vernochet, C., Ribet, D., Bartosch, B., Cosset, F. L., Heidmann, T. (2011) . The mouse IAPE endogenous retrovirus can infect cells through any of the five GPI-anchored Ephrin A proteins., PLoS Pathog 7, e1002)。