细菌蛋白提取操作步骤
以下流程是以Biovision的8001试剂盒为例，如果使用其他品牌的试剂盒，可以参考其说明书进行操作。
| 货号 | 规格 |
| 8001-100 | 100ml(25g样品) |
| 8001-500 | 500ml(125g样品) |
* 请将试剂保存于2-8°C处，使用前恢复至室温。
实验步骤
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可溶性蛋白提取
(1) 称重用来收集细胞的离心管并记录数值，将细胞悬液加到离心管中，10000g离心10min，收集细胞沉淀。
如果采用小规模的离心 (例如，≤1.5ml)，可以在13000-16000g离心10min。收集沉淀时，需要尽可能多的去除上清液，然后称重，减掉离心管的重量即为细胞沉淀的湿重，记录此数值;
(2) 按每克湿重细胞至少加4ml提前预热至室温加好蛋白酶抑制剂的 EZLys试剂，后充分吹打混匀;
(3) 每隔1min左右的时间上下混匀细胞悬液，防止细胞沉淀，孵育5-10min;
(4) 4°C 下16000g离心20min，收集上清分装保存于-80°C中备用。 -
包涵体提取:如需提取包涵体，可继续进行以下操作
(5) 将上一步中离心之后的沉淀物重悬于相同体积的EZLys试剂中，充分吹打混匀，使沉淀完全重悬;
(6) 加入溶菌酶至终浓度为1 KU/ml，轻轻混合并在室温下孵育10分钟;
(7) 室温下5000g离心15min，去除上清，收集沉淀;
(8) 准备好用双蒸水1:10稀释的EZLys溶液，按每克原始湿细胞沉淀加8ml稀释的EZLys溶液重悬沉淀，并涡旋混匀，室温下5000g离心15min，收集沉淀;
(9) 再重复两次上述步骤(8);
(10) 4°C下16000g离心15min，除去上清液收集沉淀，加入适量的稀释的EZLys溶液，保存于-80°C中备用。