如果有些膜接下来还要孵育其他指标的话,那第一次要孵育表达相对比较低的那个,第二次再敷表达比较高的,同时两个指标分子量之间最好有10kd左右的差距,两种指标的所使用的的二抗要尽量不同,如果无法避免的话,那可以分成两张膜来进行孵育。
实验步骤
- 1
- 2
- 3
- 4
TBST清洗
先用TBST洗掉膜上面的ECL液,洗3次每次5min;
strip buffer
按照strip buffer的说明书配好溶液之后,室温洗适当的时间;
曝光显影
同上一个指标一样进行一抗二抗的孵育,之后进行曝光显影,获得实验结果。
注意:
如果选用标记的一抗可以跳过二抗孵育及后面的洗膜过程,直接进行检测。