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原因排查
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预染蛋白Marker指示不准确
预染蛋白分子量不同的缓冲条件下电泳时迁移特性可能会发生某些变化,可能导致一些偏差,如果需要精准定位蛋白分子量,可以使用非预染的蛋白Marker
细胞传代次数过多
复苏低代数的细胞进行实验
不同种属的细胞、组织本身存在差异
应从过表达、敲除/敲减结果去判断是否为目的条带
蛋白修饰
不同的蛋白修饰所呈现出来的分子量是不同的,即使都是某种修饰,也有高低程度之分,例如高度糖基化和低度糖基化;应查阅相关文献或者通过切胶质谱的方式来判断具体修饰方式
多聚体
使蛋白充分变性,添加足量的还原剂及煮沸蛋白