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6.4 其他

| 7.1 Caspase 3:

 

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原因排查

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 1

    深背景出现白色条带

    可能原因
    上样量过多,一抗二抗浓度过高


    解决方案
    建议降低蛋白上样量;降低抗体浓度

  • 2

    “微笑”条带,条带两端上翘

    可能原因
    凝胶不均一,电泳温度过高,迁移过快;
    电泳仪老化


    解决方案
    建议降低电泳的电压和电流,重新配置胶;更换新的电泳仪

  • 3

    条带弥散或者拖尾

    可能原因
    蛋白上样量过多;蛋白发生降解;细胞碎片过多;电泳停止过久;核酸污染


    解决方案
    建议降低蛋白上样量;样本避免反复冻融;上样前离心;电泳完尽快转膜;加入超声处理或者用针头抽打代替“哑铃型”条带,中间空缺配胶问题,拔梳子的时候导致孔底部突起,蛋白往两端沉降;样本有杂质,把蛋白往两端挤压建议拔梳子的时候慢慢垂直往上,避免胶孔变形;蛋白杂质可通过离心去除

  • 4

    “哑铃型”条带,中间空缺

    可能原因
    配胶问题,拔梳子的时候导致孔底部突起,蛋白往两端沉降;样本有杂质,把蛋白往两端挤压


    解决方案
    建议拔梳子的时候慢慢垂直往上,避免胶孔变形;蛋白杂质可通过离心去除

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