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原因排查
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深背景出现白色条带
可能原因
上样量过多,一抗二抗浓度过高
解决方案
建议降低蛋白上样量;降低抗体浓度“微笑”条带,条带两端上翘
可能原因
凝胶不均一,电泳温度过高,迁移过快;
电泳仪老化
解决方案
建议降低电泳的电压和电流,重新配置胶;更换新的电泳仪条带弥散或者拖尾
可能原因
蛋白上样量过多;蛋白发生降解;细胞碎片过多;电泳停止过久;核酸污染
解决方案
建议降低蛋白上样量;样本避免反复冻融;上样前离心;电泳完尽快转膜;加入超声处理或者用针头抽打代替“哑铃型”条带,中间空缺配胶问题,拔梳子的时候导致孔底部突起,蛋白往两端沉降;样本有杂质,把蛋白往两端挤压建议拔梳子的时候慢慢垂直往上,避免胶孔变形;蛋白杂质可通过离心去除“哑铃型”条带,中间空缺
可能原因
配胶问题,拔梳子的时候导致孔底部突起,蛋白往两端沉降;样本有杂质,把蛋白往两端挤压
解决方案
建议拔梳子的时候慢慢垂直往上,避免胶孔变形;蛋白杂质可通过离心去除