蛋白变性
实验步骤
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WB样品的变性
如果做的是变性胶的WB则需要在上样之前对样品进行变性，变性的方法为加入混有β-ME、DTT等变性剂的蛋白上样缓冲液， 95-100°C煮沸5分钟。如果是样品为多重跨膜蛋白，可以70°C加热10分钟。
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IP之后WB的样品变性
IP之后的样品中加入混有β-ME、DTT等变性剂的蛋白上样缓冲液，将样品加热至95‒100°C并持续2-5分钟，使样品充分变性。因为样品中含有体积比较大的beads，吸取样品前将枪头用剪刀减掉尖端的部分，上样之前需要将样品吹打均匀再上样。
* 注意:如果是非变性胶的电泳则可以忽略此步骤。