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1.1.2 哺乳动物悬浮细胞

| 1.1.3  哺乳动物软组织

哺乳动物悬浮细胞蛋白提取操作步骤:

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 1

    收集细胞

    将培养瓶中的培养基转移至15ml离心管中,1000rpm离心4min收集细胞沉淀;

  • 2

    漂洗

    加入预冷的PBS将细胞沉淀转移至1.5ml EP管中,用预冷的PBS离心润洗3次,最后吸掉PBS;

  • 3

    裂解

    500μl的细胞裂解液,裂解液需要提前加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂,冰上裂解10—20min;

  • 4

    离心取上清

    4°C 12000rpm离心5min,收集上清,分装保存于-20°C或者-80°C中备用。

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