哺乳动物软组织蛋白提取操作步骤
以下流程是以Biovision的8002试剂盒为例,如果使用其他品牌的试剂盒,可以参考其说明书进行操作。100ml 的组织蛋白提取试剂可用于提取10‒20g 组织的蛋白。
货号 | 规格 |
8002-100 | 100ml(10-20g组织) |
8002-500 | 500ml(50-100g组织) |
实验步骤
- 1
- 2
- 3
提取
称量组织样本,每克组织,加入10-15ml预冷的EZLysTM 组织蛋白质提取试剂和100-150 U DNAse。如果需要的蛋白质浓度比较高,每克组织可以加4 ml组织蛋白质提取试剂;
离心取上清
使用均质器将组织充分打碎,10,000xg 4°C离心10min, 收集上清,分装保存于-20°C或者-80°C。
注意事项:
* 请将试剂保存于4°C避光处。
* 为了避免蛋白质降解,需要取适量的蛋白提取试剂中事先加入蛋白酶抑制剂混合物。