T7 RNA聚合酶残留检测试剂盒（ELISA法）

本试剂盒采用双抗体夹心法原理，酶标板微孔中包被抗 T7 RNA 聚合酶抗体，加入样本和辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体孵育，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，经酸的终止作用转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中 T7 RNA 聚合酶含量呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），根据标准曲线计算样品中 T7 RNA 聚合酶的浓度。

在mRNA制备的过程中，T7 RNA聚合酶是最主要的原料之一，是mRNA疫苗和药物研发的核心酶，但是对于药物成品来说是一种杂质，T7 RNA聚合酶可与mRNA一起通过LNP包封进入细胞释放，可被视为外来抗原，其可与互补抗体结合，诱导促炎细胞因子，作为适应性免疫反应的一部分，并导致炎症，从而连带引发mRNA的降解。因此需要更强大的评估方法来检测其残留情况，确保最终产品的质量和安全。
产品组成：

组分名称	48T	96T
反应板	48T	96T
浓缩标准品	0.025mL	0.05mL
酶结合物（100X）	0.04mL	0.08mL
样本稀释液	15mL	30mL
酶结合物稀释液	4mL	8mL
浓缩洗涤液 10X	15mL	30mL
显色液	6mL	12mL
终止液	3mL	6mL
封板膜	2张	4张

检测性能：
1、检出限：＜0.1 ng/mL 
2、检测低限：0.25 ng/mL 
3、线性范围：0.25~32 ng/mL 
4、精密度：批内变异系数≤10%，批间变异系数≤15% 
5、回收率：80%~120% 
6、特异性：只特异性识别 T7 RNA 聚合酶，其他 IVT 工具酶对测值无干扰

1、显色温度和时间对实验结果至关重要，应准确把握。 
2、洗涤过程中应使洗涤液浸泡反应板 15~30s后再甩干，以充分洗涤非特异性吸附的成分。 
3、所有试剂使用前应充分摇匀，加样时应将所加物加入酶标板孔中底部，避免加在孔壁上部，加样时注意不可溅出，不可产生气泡。 
4、若发现浓缩洗涤液中有结晶，可在 37℃水浴锅中孵育，待结晶完全溶解后再混匀稀释至工作浓度。 
5、样本中应避免引入叠氮钠（NaN3），叠氮钠会破坏辣根过氧化物酶活性，使检测值偏低。 
6、不同批次组分的试剂不可以混用，移液器枪头不可混用，避免交叉污染。 
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴好手套进行实验操作。