组织酶解试剂盒

1. 适用于20次组织酶解实验。注：每次实验适用组织样本湿重范围为10-200mg，由于实验样本的湿重不同而对应消耗不同体积的酶解液，具体实验次数会相应变化。
2. 细胞大小、总数量以及溶液内细胞密度等因素确实对一定转速和温度条件下的细胞离心富集产生影响。根据这些因素，我们一般推荐的细胞离心条件范围是300-500×g，离心时间为5-15分钟。在选择离心条件时，尽量首先尝试使用相对较低的离心速度和较短的离心时间，这样可以减少对细胞的损伤，并降低细胞死亡的风险。如果看不到细胞沉淀，可以适当提高离心条件，例如增加离心速度或延长离心时间。然而，需要注意的是，过高的离心速度或过长的离心时间可能会对细胞产生过大的机械压力，导致细胞损伤或活性降低。此外，应用低温离心条件（4℃）有助于维持细胞的高活力。低温可以减少细胞代谢活性，从而降低细胞受损的风险。在细胞悬液制备过程中，保持低温可以保持细胞的活力和完整性，提高实验的成功率和准确性。
3. 离心机转子的不同，会导致细胞沉淀在离心管底的分布有所不同。使用水平转子离心机时，细胞沉淀会集中在离心管底部，而使用角转子离心机时，细胞沉淀会分布在离心管外侧壁。当细胞沉淀量较少时，肉眼难以准确分辨，并且在吸取上清液时可能会连带吸走部分细胞沉淀，从而造成细胞损失。因此，在单细胞悬液制备过程中，我们一般推荐使用水平转子离心机，以减少细胞损失。需要注意的是，在选择离心机时，应根据实验需求和细胞类型等因素进行综合考虑。不同的细胞类型和实验步骤可能需要不同的离心条件和转子类型。因此，在使用离心机前，应先了解细胞的特性和实验要求，并选择适合的离心机和离心条件，以确保获得最佳的实验效果。
4. 在单细胞悬液制备过程中，保持轻柔操作是非常重要的，以尽可能维持单细胞的高活力状态。这包括轻柔吸取、吹打细胞悬液，以及轻柔颠倒混匀离心管中的细胞悬液等措施。在吸取和吹打细胞悬液时，应使用软头吸管或宽口的移液器吸头，避免使用硬质材料导致细胞受到损伤。同时，应尽量减少吸取和吹打的时间和次数，以减少对细胞的机械性损伤和活性流失。在混匀细胞悬液时，可以通过轻轻旋转离心管并缓慢颠倒离心管的方式，使细胞悬液充分混匀。避免使用剧烈震荡或强力搅拌的方式，以免对细胞造成损伤。此外，在制备单细胞悬液的过程中，还需要注意无菌操作和避免污染，以减少对细胞的损害和影响实验结果。
5.  细胞活性在单细胞悬液制备过程中会随时间缓慢下降。这是因为在制备过程中，细胞可能会受到物理、化学或生物因素的影响，导致其活性和完整性降低。因此，为了减少细胞活性的自然流失，我们建议尽量精简单细胞悬液制备的流程，缩短实验时间。
6. 普通的移液器吸头和离心管接触单细胞悬液过程中，倾向于出现细胞悬液挂壁现象。为了尽可能降低操作过程中细胞数目的损失，我们推荐使用低吸附的移液器吸头和离心管。
7. 细胞计数和细胞活力测定的结果极易出现偏差，因此我们推荐尽量使用2种以上的方法进行细胞技术和细胞活力测定。如采用血球计数板人工计数和机器自动化计数相结合，台盼蓝染色与荧光染染色的方法相结合测定细胞活力。