Reference：OMIP-100: A flow cytometry panel to investigate human neutrophil subsets
OMIP是国际流式学会旗下Cytometry PART A杂志中的专栏，全称为：Optimized Multicolor Immunofluorescence Panels。目的是为多色方案的科研人员提供素材，减少其方案的开发时间，提高实验效率。
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采用14色13抗体优化的多色免疫荧光板(OMIP)，对不同类型人体样本的中性粒细胞亚群进行深度分析，以了解中性粒细胞在健康和疾病状态下的可塑性。
OMIP中存在的标记物可以分析与个体发生、迁移、吞噬能力、颗粒释放和免疫调节相关的中性粒细胞亚群。
在面板设计中，我们确保将常用的荧光团FITC/ AF488、PE和APC分别分配给细胞内亚群标记Olfactomedin 4、成熟和激活标记CD10和全血亚群标记CD177。
这些标记可以很容易地替换，而不会影响中性粒细胞的核心鉴定，从而可以很容易地探索针对感兴趣的新中性粒细胞抗原的抗体或用于评估不同中性粒细胞功能的荧光底物。
对全血和纯化中性粒细胞进行面板优化。展示在临床样本(全血和唾液)和实验终点(通过体外迁移实验刺激纯化的中性粒细胞)上的应用。
本文希望可以提供一个统一的平台来分析各种样品类型中的中性粒细胞可塑性，这将有助于未来对中性粒细胞亚群在健康和疾病中的理解。
一、基础信息
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二、流式方案
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三、流式结果
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(A)对健康成人供体20 μL全血的门控策略示例。样本用时间与SSC-A进行门控以排除获取不一致，然后用FSC-A与SSC-A门进行门控以排除非细胞事件，然后使用FSC-H和FSC-A纳入单细胞事件。通过CD45+ R718和FVS780-，检测活白细胞，最后检测纯中性粒细胞为CD15hi BV786和CD66bhi PE/Fire640。描述了纯中性粒细胞种群的下游种群，包括血液亚群、迁移能力、颗粒释放、免疫调节、罕见亚群、颗粒释放免疫调节和代谢增强（GRIM）和成熟。
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(B)UMAP分析中性粒细胞门的可视化3捐赠者的外周血中性粒细胞，纯化中性粒细胞从相同的3捐赠者迁移到一个未感染的刺激或铜绿假单胞菌感染刺激，和健康的人类唾液。
(C) UMAP簇的颜色基于其来源样本，紫色代表全血（WB），蓝绿色代表未感染的迁移刺激，红色代表铜绿假单胞菌感染的迁移刺激，绿色代表唾液。
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(D)热图和树状图显示每个簇面板中每个标记的相对表达量。
