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分子克隆是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。
常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。
1. 序列查询、引物设计、酶切位点的分析
2. 模板制备
2.2 DNA纯化
2.3 RNA纯化
3. 获得目的基因
4. 酶切
5. 连接
6. 转化和筛选
7. 质粒提取
8. 测序
9. 突变(随机和定点突变)